W6/32 (小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗，不做其他科學(xué)實驗外的使用！

商品詳情：

組織來源 脾臟，扁桃體

生長特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項 ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素1受體(IL-1RⅠ)檢測試劑盒 ，英文名： IL-1RⅠ ELISA Kit

Mouse surface membrane immunoglobulin A (mIgA) ELISA Kit 小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)檢測試劑盒

ELISA 小鼠白介素-6(mouse IL-6)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-5(HumanIerleukin5)ELISAKIT人白介素-5

通用型雞氏菌(Salmonellaeeritidis;SE)試劑盒20次

ELISAKitIGFBP-3大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3

PDGFB重組食蟹猴 PDGFB / PDGF-BB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1 0.5mgIba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 離子鈣接頭蛋白抗原

ALDH1A3重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 Protein

CRELD1 Protein Human 重組人 CRELD1 蛋白

ST6GAL1 Protein Mouse 重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白

Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1 0.5mgIba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 離子鈣接頭蛋白抗原

CRELD1 Protein Human 重組人 CRELD1 蛋白

PDGFB重組食蟹猴 PDGFB / PDGF-BB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ST6GAL1 Protein Mouse 重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白

ALDH1A3重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 Protein

W6/32 (小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞)小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human urokinase type plasminogen activator (uPA/PLAU) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)檢測試劑盒

HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9檢測試劑盒豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T