產(chǎn)品展示
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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
角質(zhì)細胞生長因子 - 不含 BPE5mL多少錢 | 5mL | 來電可享受優(yōu)惠 |
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注意事項:
角質(zhì)細胞生長因子 - 不含 BPE5mL多少錢● 溶液PE *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即5 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當(dāng)延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(0 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的片段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
角質(zhì)細胞生長因子 - 不含 BPE5mL多少錢答:回收得到的DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在.7-.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應(yīng)注意哪些問題?
答:角質(zhì)細胞生長因子 - 不含 BPE5mL多少錢當(dāng)DNA 片段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長片段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長片段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
5.6-000 pg/mL 人C-C模體趨化因子26(C-C motif hemokine26)ELISA試劑盒
BACE / ASP2 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM 25 Test
SIGIRR / TIR8 抗體, 兔單抗 FCM 50 µg
0.32-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 4
0.32-20 ng/mL ELISA Kit for Human Endothelial protein C receptor
NGF / NGFB 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
5.6-000 pg/mL ELISA Kit for Human Adenylate cyclase type 0
NAP-2 / PPBP / CXCL7 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
0.32-20 ng/mL ELISA Kit for Human P2X purinoceptor 7
0.32-20 ng/mL ELISA Kit for Human Eukaryotic translation initiation factor 2-alpha kinase 3
.56-00 ng/mL ELISA Kit for Human Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor
角質(zhì)細胞生長因子 - 不含 BPE5mL多少錢釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae香菇 Lentinula edodes
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae屎腸球菌 Enterococcus faecium
芽胞桿菌 Bacillus sp.CaCO2全細胞裂解液
紅曲霉 Monascus anka豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
孔雀石綠鏈霉菌 Streptomyces malachiticus根瘤菌
海棗曲霉 Bacillus horikoshii酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
彈性蛋白酶4(ELA4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Elastase 4 (ELA4)
灰葡萄孢 Botrytis cinerea土生假絲酵母 Candida humicola
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞)蘇云金芽胞桿菌多窩亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tolwerthi
催素(PRL)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prolactin (PRL)
操作步驟:
角質(zhì)細胞生長因子 - 不含 BPE5mL多少錢切取含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠條帶。
● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
● 切膠時,請使用長波長UV (360 nm )光盒。且不要將DNA 長時間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2 稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
● 凝膠重量的稱量方法:取.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個離心管的重量需單獨稱量。
3 按照每00 mg 瓊脂糖凝膠對應(yīng)00 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-0min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴重影響DNA 段的回收效率。
● 如果總體積大于500 µl,可適當(dāng)增加溶膠時間。
● 若此時溶液變紅,可加0 µl 3M NaAC (pH 5.2)。
5 將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因為純化柱在較高溫度時結(jié)合DNA 的能力較弱。
6 2,000 rpm 離心min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
● 此時DNA 被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。2,000 rpm, 離心min,棄濾液
8 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min,棄濾液。
● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 段。
9 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min,棄濾液。
0 2,000 rpm 離心 3min ,以*去除純化柱中的液體。
● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DNA 段的充分溶解。
將離心柱置于新的.5 ml 離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-00 µl 溶液Eluent (60℃預(yù)熱),靜置2min 。2,000 rpm 離心min,管底即為目的DNA 段。貯存于-20℃。
● 溶液Eluent 可用無菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的段的多少、用戶對目的濃度要求而定。
● 對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA 目的段的產(chǎn)量。