產(chǎn)品展示
產(chǎn)品描述:
大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物【Rat Breast: Normal Breast Derivatives】
大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代乳腺上皮細(xì)胞提取的,大鼠原代乳腺上皮細(xì)胞從正常大鼠乳腺組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA*鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及0mg總RNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應(yīng)用: <>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
本公司供應(yīng)的細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息,點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多原代細(xì)胞提取物。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng) |
英文名稱(chēng) | Rat Breast: Normal Breast Derivatives |
價(jià)格 | 來(lái)電可享受優(yōu)惠 |
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技術(shù)傳授:
凍存培養(yǎng)基
大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)凍存細(xì)胞時(shí)必須使用的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含0% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約00-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至0分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 °C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
細(xì)胞可重發(fā)跟不可重發(fā):
可以重發(fā)的情況有哪些?
()細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
()客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
以下是大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)的相關(guān)產(chǎn)品:
兔抗CC4A多克隆抗體 英文名:Anti-CC4A rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CHFR多克隆抗體 英文名:Anti-CHFR rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CNNM2多克隆抗體 英文名:Anti-CNNM2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗BCL7A多克隆抗體 英文名:Anti-BCL7A rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗NFE2L3多克隆抗體 英文名:Anti-NFE2L3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗*多克隆抗體 英文名:Anti-* rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP26C多克隆抗體 英文名:Anti-CYP26C rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP4V2多克隆抗體 英文名:Anti-CYP4V2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP3A7多克隆抗體 英文名:Anti-CYP3A7 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP4A/22多克隆抗體 英文名:Anti-CYP4A/22 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP4F多克隆抗體 英文名:Anti-CYP4F rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP4X多克隆抗體 英文名:Anti-CYP4X rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
大鼠乳腺上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)Abrine 相思子堿 2339-55-9 20mg
TRIS-HCl Tris鹽酸 00g 瓶
Myricetrin 楊梅苷 792-87-7 20mg
Acyl-CoA Oxidase 酯酰氧化酶 500U 瓶
結(jié)晶紫染色液(2.5%) 0ml 瓶
EGTA 乙二醇-雙-(2-氨基乙)四乙酸 5g 瓶
Paraformaldehyde 多聚甲醛 25g 瓶
Parthenolide 小白菊內(nèi)酯 20554-84- 20mg
小鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
牛外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
(TCEP) 三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽 g 瓶
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