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大鼠胰島細(xì)胞提取物【Rat Islet: Normal Islet Derivatives】
     大鼠胰島細(xì)胞提取物圖片大鼠胰島細(xì)胞提取物是從大鼠原代胰島細(xì)胞提取的，大鼠原代胰島細(xì)胞從正常大鼠胰腺組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。        cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA*鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及0mg總RNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。        潛在的應(yīng)用： <>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
培養(yǎng)步驟：
大鼠胰島細(xì)胞提取物圖片對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

兔抗PPFIBP多克隆抗體 英文名：Anti-PPFIBP rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗ZNF575多克隆抗體 英文名：Anti-ZNF575 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗NKX2-8多克隆抗體 英文名：Anti-NKX2-8 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗RNF3B多克隆抗體 英文名：Anti-RNF3B rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗OSR2多克隆抗體 英文名：Anti-OSR2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗ARX多克隆抗體 英文名：Anti-ARX rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MNT多克隆抗體 英文名：Anti-MNT rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗TEA3多克隆抗體 英文名：Anti-TEA3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗ELF4多克隆抗體 英文名：Anti-ELF4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗NFIP多克隆抗體 英文名：Anti-NFIP rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

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兔抗TAOK3多克隆抗體 英文名：Anti-TAOK3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

大鼠胰島細(xì)胞提取物圖片羊抗人IgG-FITC 0.3ml  支

大豆分離蛋白 250g  瓶

trans-o-Coumaric Acid 鄰羥基肉桂酸 64-60-8  20mg

Monensin, sodium salt 莫能霉素鈉 g  瓶

anti-GAPDH Rabbit Polyclonal antibody 00ul  瓶

Ionomycin calcium salt 鈣離子霉素 mg  瓶

5- UDP 尿苷-5-二磷酸 00mg  瓶

玻璃勻漿器 5ml  個

Fast Blue BB Salt 固藍(lán)BB鹽 5g  瓶

Gallic acid 沒食子酸 49-9-7  20mg

Spermidie 亞精胺 g  支

注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠胰島細(xì)胞提取物圖片，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。