產(chǎn)品展示
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
CAL 33人舌鱗狀細(xì)胞癌
商品屬性
種屬 | 人 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮樣 | 編號(hào) | GOY-01X1981 |
商品介紹
種屬來源:人
性別年齡:男性,69歲
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣
細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件:DMEM + 10% h.i. FBS + 2 mM L-glutamine37 ℃, 5% CO2
凍存條件:90% FBS + 10% DMSO
傳代方法:1:3到1:5傳代,1-2天傳1代
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠神經(jīng)型合酶(NOS1)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: NOS1 ELISA Kit
Mouse cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)檢測(cè)試劑盒
RatVitaminC,VCELISAKit 大鼠C(VC)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHB-EGF(Humanheparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor)ELISAKit人肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子
細(xì)胞半胱(cysteine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)檢測(cè)試劑盒
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
信號(hào)素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
信號(hào)素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
CAL 33人舌鱗狀細(xì)胞癌小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒
Rat osteoclast differeiation factor (ODF) ELISA Kit 大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)檢測(cè)試劑盒
Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit 人抗0脂抗體(Apl/APA)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanbetacellulin,BTC檢測(cè)試劑盒人β細(xì)胞素(BTC)檢測(cè)試劑盒
植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3次
Humaargetedribonuclease,ELISAKit人靶向核糖核酸酶()檢測(cè)試劑盒
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)檢測(cè)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)檢測(cè)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠白三烯D4(LTD4)檢測(cè)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝