產(chǎn)品展示
HCMEC/D3永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
種屬 | 人 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 | 貼壁 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細(xì)胞形態(tài) | 紡錘形細(xì)胞 | 編號(hào) | GOY-01X1885 |
商品詳情:
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 紡錘形細(xì)胞
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長培養(yǎng)基:
hCMEC/D3 細(xì)胞專用培養(yǎng)基(CM-0843)
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:6
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
The hCMEC/D3 cell line was derived from human temporal lobe microvessels isolated from tissue excised during surgery for control of epilepsy. The primary isolate was enriched in cerebral endothelial cells (CECs). In the first passage, cells were sequentia |
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠白介素28B(IL-28B)檢測試劑盒 ,英文名: IL-28B ELISA Kit
Mouse ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)檢測試劑盒
ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3(mouse IGBPF-3) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIMA(HumanIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit人缺血修飾白蛋白
通用型胱(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitINH-B大鼠抑制素B
IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein
Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原
KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein
EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標(biāo)簽)
FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)
Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原
EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標(biāo)簽)
IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein
FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)
KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein
HCMEC/D3永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neuraminidase (NA) ELISA Kit 人神經(jīng)酶(NA)檢測試劑盒
HumanleukocyteaigenE,HLA-EELISAKit 人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAV檢測試劑盒人抗甲型肝病毒IgM抗體(ai-HAV)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物0酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconatedehydrogenase;PGD)電泳分析試劑盒5次
Humanverylowdensitylipoproteieceptor,VLDLRELISAKit人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠胃泌素(mouse Gasin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
四、貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細(xì)胞僅供科研使用。
八、備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
九、 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。